超濾離心管是實驗中(zhong)用到的器皿，使用過(guo)程中(zhong)經常(chang)會遇到一些問題，上海登寧總結了以下常(chang)遇到的問題及其(qi)解決方法，我們一起去(qu)看下吧！
離心(xin)管(guan)是一個(ge)簡單(dan)的(de)可(ke)以承(cheng)受高轉(zhuan)速壓力的(de)管(guan)子(zi),比(bi)如(ru)離一些樣品,分(fen)離出上(shang)清沉淀。超濾離心(xin)管(guan)會有一個(ge)類似于(yu)內管(guan)和外(wai)管(guan)的(de)兩個(ge)部分(fen),內管(guan)中(zhong)是帶有一定分(fen)子(zi)量的(de)膜,當高速離心(xin)時,分(fen)子(zi)量比(bi)它小的(de)就漏(lou)到下面的(de)管(guan)子(zi)（即外(wai)管(guan)）中(zhong)了,分(fen)子(zi)量比(bi)它大的(de)就截(jie)留在上(shang)面（即內管(guan)中(zhong)）,就是超濾的(de)原理.常用于(yu)濃縮樣品。
超濾離心管的分子量選(xuan)擇：
按照樣品(pin)(pin)量(liang)(liang)和目標(biao)分(fen)子量(liang)(liang)選擇(ze)適當的(de)(de)(de)(de)超濾離(li)心(xin)(xin)管，為了得到zui高的(de)(de)(de)(de)收率，所選濾膜(mo)的(de)(de)(de)(de)截(jie)留分(fen)子量(liang)(liang)MWCO建議(yi)選擇(ze)所需(xu)截(jie)留分(fen)子大(da)小(xiao)的(de)(de)(de)(de)1/3左(zuo)右，不超過(guo)目標(biao)分(fen)子量(liang)(liang)的(de)(de)(de)(de)一半。因為超濾膜(mo)上(shang)孔(kong)徑(jing)是平均孔(kong)徑(jing)，膜(mo)上(shang)的(de)(de)(de)(de)孔(kong)并非均勻，離(li)心(xin)(xin)高壓下也(ye)可(ke)能滲漏，因此截(jie)留孔(kong)徑(jing)越(yue)小(xiao)，流速越(yue)慢但截(jie)留比例更大(da)。如果樣本(ben)濃度低(di)體(ti)(ti)(ti)積(ji)大(da)，可(ke)選擇(ze)較小(xiao)容(rong)(rong)積(ji)的(de)(de)(de)(de)超濾管多次(ci)重復(fu)加樣離(li)心(xin)(xin)。如果同時(shi)(shi)需(xu)要脫鹽和去除可(ke)溶(rong)小(xiao)分(fen)子雜(za)質，可(ke)將待濃縮樣品(pin)(pin)稀釋到超濾管zui大(da)容(rong)(rong)積(ji)再離(li)心(xin)(xin)，重復(fu)2次(ci)可(ke)除去99%鹽。避(bi)免過(guo)長(chang)時(shi)(shi)間(jian)或者過(guo)速離(li)心(xin)(xin)，雖然高品(pin)(pin)質的(de)(de)(de)(de)產品(pin)(pin)都有防死(si)端設計，可(ke)避(bi)免過(guo)度離(li)心(xin)(xin)造(zao)成(cheng)(cheng)膜(mo)表(biao)面干而造(zao)成(cheng)(cheng)不可(ke)逆吸附。避(bi)免過(guo)度濃縮，zui終體(ti)(ti)(ti)積(ji)越(yue)小(xiao)，越(yue)容(rong)(rong)易因表(biao)面吸附而損失得率。離(li)心(xin)(xin)后用Tips輕輕吹(chui)吸幾次(ci)濾膜(mo)截(jie)留的(de)(de)(de)(de)溶(rong)液(ye)(ye)，必要時(shi)(shi)補(bu)加一定(ding)體(ti)(ti)(ti)積(ji)的(de)(de)(de)(de)緩沖液(ye)(ye)沖洗膜(mo)表(biao)面，有助于減(jian)少膜(mo)表(biao)面吸附，能提(ti)高回(hui)收率。盡量(liang)(liang)避(bi)免Tips接觸膜(mo)表(biao)面。
超濾(lv)離(li)心(xin)管是(shi)否要(yao)預(yu)處(chu)理：
超濾(lv)離(li)心(xin)管(guan)通常不(bu)需要預(yu)(yu)處(chu)理即可(ke)使用(yong)，不(bu)過對于蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質樣本處(chu)理，特(te)別是較稀的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質溶(rong)(rong)(rong)液(ye)(ye)來說(<10ug/mL),用(yong)超濾(lv)膜(mo)濃縮回收(shou)率常常是不(bu)定量的(de)(de)(de)。雖然PES材料使非特(te)異吸附zui小(xiao)化，但是,某些蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai),特(te)別是稀的(de)(de)(de)時候,會有問(wen)題。非特(te)異結合(he)的(de)(de)(de)程(cheng)度隨著個別蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)結構的(de)(de)(de)不(bu)同(tong)而不(bu)同(tong)。含(han)有帶(dai)電的(de)(de)(de)或者疏水(shui)結構域的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質更易于不(bu)可(ke)逆結合(he)到不(bu)同(tong)表面。對超濾(lv)離(li)心(xin)管(guan)表面做鈍化預(yu)(yu)處(chu)理可(ke)降低(di)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質在膜(mo)表面的(de)(de)(de)吸附性損失(shi)，大(da)多(duo)數情況下，在濃縮稀蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)溶(rong)(rong)(rong)液(ye)(ye)之前預(yu)(yu)處(chu)理柱(zhu)(zhu)子可(ke)以提高回收(shou)率，因(yin)為(wei)溶(rong)(rong)(rong)液(ye)(ye)可(ke)填滿膜(mo)和表面暴露的(de)(de)(de)空白(bai)(bai)(bai)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)吸附位點。鈍化的(de)(de)(de)方法是預(yu)(yu)先用(yong)zui高容(rong)積的(de)(de)(de)鈍化溶(rong)(rong)(rong)液(ye)(ye)預(yu)(yu)浸泡柱(zhu)(zhu)子1小(xiao)時以上(shang)，蒸餾水(shui)沖洗柱(zhu)(zhu)子，再用(yong)蒸餾水(shui)離(li)心(xin)一(yi)次(ci)除(chu)去可能殘留在(zai)膜(mo)上的鈍化(hua)溶(rong)液。注意鈍化(hua)處(chu)理(li)后別讓(rang)膜(mo)干了。如果要留待(dai)以(yi)后使用，需(xu)要加(jia)無菌蒸餾(liu)水保持(chi)膜(mo)濕潤。
常用的鈍化溶液可選擇：
1、1％牛血清白蛋白磷酸(suan)緩沖(chong)液溶液
2、5％十二烷基(ji)磺酸(suan)鈉蒸餾(liu)水(shui)水(shui)溶(rong)液(ye)
3、5％Tween-20非離子活性劑蒸餾水(shui)溶(rong)液
4、5％Triton-X 蒸餾水(shui)溶(rong)液
5、5％聚乙二醇化合物蒸餾水(shui)溶液
6、1％免疫球(qiu)蛋白IgG磷酸(suan)緩沖液溶液
超濾(lv)離(li)心(xin)管因為需要高速離(li)心(xin)，某些對(dui)剪切(qie)力(li)或壓力(li)誘導下易(yi)變(bian)性的(de)不穩定樣品可(ke)能不太適合。另外超濾(lv)膜上孔(kong)徑是平均孔(kong)徑，膜容(rong)易(yi)堵(du)，對(dui)于有微小(xiao)顆粒或者碎片的(de)樣品，先用較大孔徑的超(chao)濾管過濾一次，再進(jin)行下(xia)一步濃縮。
超濾(lv)離心管是否(fou)可(ke)以重復使用：
離心超濾(lv)管(guan)(guan)通常不(bu)(bu)能消毒再次性使(shi)用(yong)(yong)(yong)。由于單管(guan)(guan)價格并不(bu)(bu)便(bian)宜(yi)，不(bu)(bu)少人(ren)嘗試重復(fu)使(shi)用(yong)(yong)(yong)----經驗(yan)是用(yong)(yong)(yong)蒸(zheng)餾水(shui)清洗膜(mo)表面多次，離心一(yi)次到兩次，那(nei)種可(ke)(ke)以反(fan)向離心的(de)小管(guan)(guan)子可(ke)(ke)以加蒸(zheng)餾水(shui)浸泡后反(fan)向多離心一(yi)次，會好些。可(ke)(ke)重復(fu)用(yong)(yong)(yong)于同(tong)(tong)一(yi)樣品，不(bu)(bu)用(yong)(yong)(yong)時可(ke)(ke)用(yong)(yong)(yong)蒸(zheng)餾水(shui)浸泡，但(dan)是要(yao)防止(zhi)細菌污染。不(bu)(bu)同(tong)(tong)樣品就(jiu)不(bu)(bu)要(yao)混用(yong)(yong)(yong)了。有人(ren)說泡在20%酒精、1N的(de)NaOH（氫氧化鈉）中，防止(zhi)長(chang)菌，而且防干(gan)，只要(yao)超濾(lv)膜(mo)侵了水(shui)，就(jiu)不(bu)(bu)可(ke)(ke)以再讓它(ta)干(gan)，但(dan)也有人(ren)說會破壞膜(mo)結構。反(fan)正廠家一(yi)般不(bu)(bu)支持重復(fu)用(yong)(yong)(yong)。多次重復(fu)使(shi)用(yong)(yong)(yong)會堵塞濾(lv)膜(mo)上(shang)的(de)孔徑，甚(shen)至出現漏液(ye)現象，影響實驗(yan)結果(guo)。
上海登寧科技有限公(gong)司是國內專業(ye)的實驗過濾(lv)材料提供商，致(zhi)力于將質(zhi)量、可靠性和(he)操作性突出的產品帶給每一(yi)位客戶(hu)。公(gong)司產品包括(kuo)各類濾(lv)紙、濾(lv)膜(mo)、濾(lv)器(qi)以及輔助器(qi)材，普遍應用于生(sheng)命科學(xue)，農業(ye)，藥物醫(yi)學(xue)，化工，食品，水質(zhi)分析，環(huan)境監測等各個領(ling)域，公(gong)司與(yu)各廠家建(jian)立了穩定的合作關系，確(que)保品(pin)質的同時更可(ke)以滿足客戶對于便捷和實惠的需(xu)求。
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